LE LAIT

Manipulation 4

Caractérisation du lactose par formation d'osazone


1. But de la manipulation

En faisant réagir un glucide avec le chlorhydrate de phénylhydrazine, on obtient une osazone, dérivé cristallin dont la forme observée au microscope est caractéristique et dont le point de fusion permet l'identification du glucide.

2. Principe

La fonction carbonyle des aldoses et des cétoses (glucides aldéhydiques et cétoniques) peut subir une réaction de condensation avec des dérivés aminés tels la phénylhydrazine :

3. Matériel et produits

  • 1 statif avec noix et pince
  • 1 bécher de 400 mL (bain-marie)
  • lactose
  • 1 éprouvette
  • 1 pince en bois
  • chlorhydrate de phénylhydrazine
  • 1 bec Bunsen
  • 1 binoculaire ou microscope
  • acétate de sodium
  • 1 trépied et 1 toile métallique
  •    

     

    4. Mode opératoire

    Faire chauffer l'eau du bain-marie et pendant ce temps, introduire successivement dans l'éprouvette 0,2 g de lactose, 0,4 g de chlorhydrate de phénylhydrazine, 0,6 g d'acétate de sodium et 4 mL d'eau. Agiter pour dissoudre les solides et placer l'éprouvette dans le bain-marie à l'ébullition. Chauffer en agitant de temps en temps pendant environ dix minutes. La solution devient jaune.

    Sortir ensuite l'éprouvette du bain-marie et laisser refroidir à l'air. Après une vingtaine de minutes des cristaux jaunes de lactosazone apparaissent.

    En plaçant sur une lamelle de microscope une goutte de la suspension contenant les cristaux, on peut observer la forme caractéristique en "oursins" des cristaux de lactosazone (photo ci-dessous).

    5. Bibliographie

    Vogel, A.I., "A text-book of Practical Organic Chemistry", Longmans 1959, p. 455.

     


    Université Libre de Bruxelles - - Dernière modification : 06-2017

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